Especie / Grupo Animal Rat
Método de Microscopía Microscopía óptica de campo claro
Método de inclusión Otros
Método de tinción Various
Grosor de corte Otros

Descripción

Son muchas las técnicas histológicas que se emplean para el estudio del cerebro y cada una de ellas muestra una imagen diferente ya que cada una tiñe elementos diferentes.
Este esquema interactivo muestra varios ejemplos de una sección equivalente del cerebro de rata teñida con diferentes técnicas. Aunque se trata de zonas equivalentes cada imagen es diferente ya que cada técnica tiñe elementos diferentes del tejido nervioso.
Las técnicas incluidas son:
- Hematoxilina eosina (corte de 7 um de grosor). Esta técnica tiñe todos los elementos nerviosos en diferentes intensidades de rosa y los núcleos celulares de color violeta. Como el corte es de grosor inferior al tamaño de la neurona (al igual que en otras técnicas que usan cortes de similar grosor), no se pueden ver neuronas completas, aunque si se pueden diferenciar los somas neuronales. El resto de elementos de todas esas neuronas (dendritas, axones) no pueden ser individualizados y forman una matriz que se conoce como parénquima nervioso y que con esta técnica se tiñe de color rosa. Esta técnica general no suele usarse habitualmente en el estudio del cerebro, en su lugar se suele utilizar la técnica de Nissl, una técnica basada en el colorante azul de toluidina y que da unos resultados similares, aunque de color azul y no rosa. Estas técnicas se utilizan para estudiar la cito-arquitectura de somas neuronales (organización en capas y agrupaciones o "núcleos")
- Klüver y Barrera (corte de 8 um de grosor). Esta técnica es específica del estudio del cerebro. Muestra somas neuronales teñidos de un color azul-violeta, el parénquima nervioso de color azul pálido y, lo más significativo, los axones mielínicos se tiñen de color azul intenso. Evidentemente esta técnica se usa para el estudio de los diferentes haces de fibras mielínicas del cerebro y ha permitido establecer las grandes rutas de comunicación entre las diferentes zonas del cerebro.
- Técnica de Golgi (corte de 150 um de grosor). Esta es una técnica muy especial usada exclusivamente en el estudio del sistema nervioso. Se basa en dos hechos propios de esta técnica; - el primero es el grosor de corte (100-150 um), que permite que una neurona completa se aloje en el corte, por lo que permite el estudio de neuronas completas; - el otro hecho característico es debido al método de impregnación argéntica que esta técnica usa y que hace que solamente una muy pequeña proporción de neuronas se impregnen, lo que permite visualizar neuronas individuales. Esta técnica se utiliza para el estudio de neuronas completas (con el árbol dendrítico) y su clasificación morfológica. Esta técnica presenta algunas limitaciones, así por ejemplo, el nitrato de plata que utiliza esta técnica no puede atravesar la vaina de mielina, por lo que los axones mielinizados no se tiñen y solamente se pueden estudiar los árboles axónicos no mielinizados. Esta técnica también puede teñir células gliales y vasos sanguíneos, lo cual a veces enmascara a las propias y neuronas y puede hacer difícil el seguimiento de sus dendritas y axón.
- Técnicas Inmuno-Histo-Químicas (IHQ) (corte de 30 um de grosor). Estas técnicas se basan en reacciones inmunes, así se usan anticuerpos específicos contra sustancias (proteínas) propias de ciertos tipos celulares. El anticuerpo está ligado con una sustancia que luego se colorea mediante una reacción histoquímica. Así si elegimos (como en el ejemplo) un anticuerpo contra la GFAP (Glial Fibrilar Acid Protein - Proteína Ácida Fibriliar Glial) teñiremos solamente astrocitos o células relacionadas, ya que solamente este linaje celular expresa esta proteína. Obviamente se trata de una técnica muy precisa y específica que permite no solamente el estudio detallado de los diferentes tipos celulares del sistema nervioso, sino que además ha abierto las puertas al estudio de los procesos moleculares que se suceden en el interior de las células en determinadas condiciones o circunstancias. Para poder mantener la capacidad antigénica del tejido es necesario que el proceso de fijación sea muy suave y consecuentemente el procesado histológico posterior rápido, así que el corte se suele realizar por congelación a unas 30 um de grosor. Todo ello hace que la conservación histológica y la claridad de las imágenes al microscopio no sea excelente.

Hay más técnicas histológicas de estudio del sistema nervioso, aparte de las aquí presentadas, aunque estas son las más habituales.

Técnicas histológicas para el estudio del sistema nervioso

Valentin MartínWesapiens/Natura
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